STEMCELL Technologies STEMdiff STEMdiff Hematopoietic Kit
- 研究用
STEMdiff™ Hematopoietic Kit（ST-05310）は、ヒトES/iPS細胞 (hPSC) から機能性の造血前駆細胞（hematopoietic progenitor cell; HPC）を作製する培地です。無血清およびフィーダーフリー条件のシンプルで再現性の高いプロトコルによって、CD34、CD45、およびCD43を発現するHPCに分化させます。
2段階からなる堅牢なプロトコルは、初めに細胞を中胚葉へ誘導し、続いてHPCへ分化させます。hPSCを播種して12日後に、25〜65％ (平均43％) のCD34+CD45+ 前駆細胞を含む造血細胞集団を回収できます。この集団には、コロニー形成単位 (CFU) アッセイで機能性の造血コロニーを形成できる前駆細胞が含まれます。
本品は、mTeSR™1 (ST-85850)、mTeSR™ Plus (ST-100-0276)、またはTeSR™-E8™ (ST-05990) で維持されたhPSCの分化に最適です。
2018/05/14 12:00の製品情報
本製品は研究目的にのみ使用し、人や動物の医療用・臨床診断用・食品用としては使用しないようにご注意ください。
製品の特長
STEMdiff™ Hematopoietic Kitで、hPSCから造血前駆細胞 (HPC) へ分化誘導
- 明確な組成 無血清、フィーダーフリーの培地
- 使い易い 単層培養中に遊離した浮遊状態のHPCを回収
- 迅速 hPSCから12日間でHPCを作製
- 高収量 1キットあたり 4 - 18 x 106 個の CD34+CD45+ HPCを作製
- 柔軟性 複数のhPSC株から安定してHPCを作製
造血分化のワークフロー
On Day -1, harvest and seed human ES/iPS cell colonies as small aggregates in mTeSR™1, mTeSR™ Plus, or TeSR™-E8. After one day, TeSR™ medium is replaced with Medium A (STEMdiff™ Hematopoietic Basal Medium containing Supplement A) to begin inducing the cells towards a mesoderm-like state (day 0). On day 2, a half medium change is performed with fresh Medium A. On day 3, the medium is changed to Medium B (STEMdiff™ Hematopoietic Basal Medium containing Supplement B) with half medium changes on days 5, 7 and 10, to promote further differentiation into hematopoietic cells. Typically, by day 12, large numbers of HPCs can be harvested from the culture supernatant.
データ紹介
CD34+CD45+/CD43+ HPCを効率良く強力に作製
Percentages and total numbers of CD34+CD45+ cells in cultures of hES (H1 and H9) or hiPS (WLS-1C, STiPS-F016, STiPS-M001 and STiPS-B004) cells are shown. Data shown as mean ± SEM; n ≥ 3.
hPSC由来HPCは、さまざまな系列の造血コロニーを産生
![05310-cfuassay[1].jpg](/products/images/05310-cfuassay%5B1%5D.jpg)
Cells in suspension were harvested from the cultures on Day 12 of the hematopoietic differentiation protocol and assessed in colony-forming unit (CFU) assays using MethoCult™ H4435 Enriched (Catalog #04435) methylcellulose-based medium.
(A) CFU frequencies in cultures of 6 different hPSC lines. (Data shown as mean ± SEM; n ≥ 3.) The CFU frequencies were variable between the different cell lines, with on average approximately 120 CFU per 10,000 hPSC-derived HPCs plated.
(B) The progenitor cell types observed included granulocyte/macrophage (CFU-M, CFU-G and CFU-GM), erythroid (BFU-E and CFU-E) and occasional mixed (CFU-GEMM) colonies. Representative colony images are shown at 40X magnification.
詳しいデータは、学会発表ポスター（STEMCELL Technologies社）をご覧ください。
