STEMCELL Technologies STEMdiff STEMdiff Erythroid Kit
- 研究用
STEMdiff™ Erythroid Kit（ST-100-0074）は、ヒト胚性幹（ES）および人工多能性幹（iPS）細胞を、無血清かつフィーダーフリーの条件下で、Glycophorin AおよびCD71を発現する赤血球前駆細胞（赤芽球）へと分化させるために設計されています。2次元培養による簡易な分化プロトコルを2段階で実施します。
第一ステージ（10〜12日間）では、STEMdiff™ Hematopoietic Supplement A、次いでSupplement E1を基礎培地に添加し、赤血球分化傾向をもつ中胚葉へと細胞を誘導します。第一ステージの最後に、造血前駆細胞を培養上清から容易に回収できます。第二ステージ（10〜24日目の14日間）では、Supplement E2とStemSpan™ SFEM IIを用いて、細胞をさらに赤血球前駆細胞へと分化させます。
赤血球分化の14日間に細胞は通常241 +/- 190倍（95％CI）まで増幅し、24日目の細胞集団には通常74 +/- 5％（95 %CI: COnfidence interval）のCD71+GlyA+赤芽球が含まれます。
本キットで作製した細胞を成熟に適した培養条件に移すと、さらに正赤芽球および網状赤血球へと成熟させることができます。
本品は、mTeSR™1（ST-85850）、mTeSR™ Plus（ST-100-0276）、およびTeSR™-E8™（ST-05990）で維持したヒト多能性幹細胞（hPSC）の分化に最適化されています。
2018/05/14 12:00の製品情報
本製品は研究目的にのみ使用し、人や動物の医療用・臨床診断用・食品用としては使用しないようにご注意ください。
製品の特長
STEMdiff™ Erythroid Kitをもちいて、hPSCから赤血球前駆細胞へと効率良く分化できます
- 無血清、フィーダーフリーの組成です
- 複数のhPSC株から、安定して赤芽球を作製できます
- 得られる赤芽球は、必要に応じて成熟させることができます
データ紹介
CD71+GlyA+ 赤血球を安定的に高効率で作製
hES and hiPS cells were induced to differentiate into CD71+GlyA+ cells using the 24-day protocol. Following the initial 10-day culture period and at the end of the 24-day protocol, cells were harvested from the supernatant and analyzed by flow cytometry. Dead cells were excluded by light scatter profile and propidium iodide staining. (A) Representative flow cytometry plot for iPSC-derived (1C) cells analyzed on day 10. Cells were identified as CD34+CD43+ hematopoietic progenitors. (B) After 24 days of culture, cells were identified as having differentiated into CD71+ GlyA+ erythroblasts.
hPSC由来赤血球のヘモグロビン発現と典型的な形態
(A) Erythroid cells generated with the STEMdiff™ Erythroid Kit express a mix of primitive (embryonic) and definitive (fetal, adult) hemoglobin. Shown are the results of qPCR analysis for globin gene expression after 24 days of culture. (B) A picture of the cell pellet shows that cells produced in culture are hemoglobinized. (C) Cells display typical basophilic erythroblast morphology after 24 days of culture using the STEMdiff™ Erythroid Kit (40X magnification, May-Grunwald Giemsa stain).
詳しいプロトコールとデータはこちら：
STEMdiffをもちいた多能性幹細胞からの赤芽球作製 (STEMCELL Technologies社ウェブサイトへリンク)
製品に関するウェビナーはこちら（視聴にはSTEMCELL Technologies社ウェブサイトでの登録が必要です）：
Serum- and Feeder-Free Differentiation of Erythroid Progenitor Cells from hPSCs
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