STEMCELL Technologies hPSC Genetic Analysis Human Pluripotent Stem Cell Endoderm qPCR Array
- 研究用
Human Pluripotent Stem Cell (hPSC)-Derived Endoderm qPCR Arrayは、ヒトES/iPS細胞(hPSC)由来の胚体内胚葉と、膵臓、肝臓、腸管細胞を含むその子孫を特徴付けるために設計されています。このqPCRアレイは、in vitroで分化した後のhPSC由来内胚葉細胞の遺伝子発現プロファイルを提供し、内胚葉系列への指向性分化のためのプロトコール開発を助けます。遺伝子は、hPSCまたはそれに由来する外胚葉、中胚葉、内胚葉系列細胞(D'Amour et al.)、および膵臓(Kroon et al.)、肝臓(Hay et al.)、腸管(Grapin-Botton & Melton)の各前駆細胞で実証された発現に基づいて選択されています。
qPCRは、複数のサンプルにわたる遺伝子発現の定常状態mRNAレベルの変化を決定するために使用され、一般に内部標準遺伝子に対する相対的発現に正規化されます。遺伝子特異的プライマーは、mRNAから逆転写されたcDNAプール内の標的配列を増幅し、TaqMan®技術と同様に、ハイブリダイズした配列特異的プローブがTaq DNAポリメラーゼの5'エキソヌクレアーゼ活性から蛍光シグナルを生じます。蛍光シグナルの蓄積速度は、サンプルcDNAの定量に使用されます。それによって元の細胞溶解液中のmRNA量がわかります。
このqPCRアレイには、hPSCまたはhPSC由来の外胚葉、中胚葉、内胚葉、および膵臓、肝臓、腸管前駆細胞と相関する遺伝子と、6つの内在性(ハウスキーピング)コントロール遺伝子を含む90個の遺伝子を検出するための検証済みプライマーとプローブが含まれます。TBP(TATAボックス結合タンパク質)qPCR Control Templateは、合成DNAポジティブコントロールとして提供されています。追加の遺伝子情報およびqPCR分析ツールは、www.stemcell.com/qPCRanalysisで入手できます。