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2019/09/02

「StemSpan」　造血細胞増殖のための培地とサプリメント

用途別細胞培養

StemSpan™は、STEMCELL Technologies社が提供する造血細胞培養向けの培地およびサプリメントです。

StemSpan™ 無血清基礎培地は、任意の造血増殖因子やその他の刺激を加えることで、ヒト造血幹細胞・前駆細胞（hematopoietic stem and progenitor cell; HSPC）の増殖や系列特異的な分化を促進できます。
StemSpan™ サプリメントは、CD34+ 幹細胞・前駆細胞の増殖を選択的に促進、あるいは赤血球系、骨髄系（顆粒球または単球）、巨核球の各前駆細胞への分化を刺激するよう配合された、組み換えヒトサイトカインとその他の添加物のプレミックスカクテルで、StemSpan™ 基礎培地に添加して使用します。
このほか、間質細胞不使用（ストローマフリー）の条件でCD34+細胞をT細胞、B細胞、NK細胞へ分化させる専用キット（培地＋サプリメント）があり、リンパ球産生の研究に利用できます。

StemSpan™を含むHSPC研究用製品群のカタログ（英語）は、こちら＞＞

なぜStemSpanが使用されるのか？
StemSpan 増殖用無血清基礎培地
StemSpan 増殖用サプリメント
StemSpan ヒト用キット
StemSpan主要文献　アプリケーション別
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なぜStemSpanが使用されるのか？

再現性
原料の選択とスクリーニングを厳密に行うことで、ロット間差を最小限に抑え、最適な培養条件を安定的に提供します
利便性
培地にはサイトカインが含まれないため、StemSpan™サプリメントやサイトカイン等を柔軟に添加できます
高性能
StemSpan™ SFEM IIに適切な増殖用サプリメントを添加すると、ヒトCD34⁺細胞の増殖、および赤血球、顆粒球、単球、巨核球への分化を他の培地より促進します（図1, 表1）
無血清で明確な組成
無血清やゼノフリーの培地に加え、HSPC培養向け市販培地で初めての動物由来フリー組成（StemSpan™-AOF *）も選択できます
* StemSpan-ACFの後継品。cGMP（current Good Manufacturing Practice、現行適正製造基準）に沿って、製造および試験されています。

StemSpan 増殖用無血清基礎培地

製品名	組成	対象の動物種	推奨用途	成分
StemSpan™ SFEM	無血清	・ヒト・マウス・ラット・非ヒト霊長類	無血清条件下での、ヒト造血幹細胞・前駆細胞(HSPC)の培養(図1)	・BSA ・Insulin ・Tranferrin ・Supplements ・IMDM base
StemSpan™ SFEM II	無血清	ヒト	無血清条件下での、ヒトHSPCの培養 (図1, 表1)	・BSA ・Insulin ・Tranferrin ・Supplements ・IMDM base
StemSpan™-XF （StemSpan H3000の後継品）	ゼノフリー	ヒト	ヒト以外の動物由来の成分を含まない条件下での、ヒトHSPCの培養（図1）	・ヒト由来および組み換えヒトタンパク質・IMDM base
StemSpan™-AOF （StemSpan-ACFの後継品）	動物由来フリー（2次原料まで）	ヒト	ヒトと動物由来の成分を含まない条件下での、ヒトHSPCの培養（図1）	・組み換えおよび合成成分・IMDM base
StemSpan™-ACF Erythroid Expansion Medium （StemSpan ACF-E）	動物性成分フリー	ヒト	ヒト赤血球細胞の培養と増殖（図2）	・組み換えおよび合成成分・IMDM base

図1. StemSpanおよび他社の基礎培地にStemSpan CD34⁺ Expansion Supplementを添加した場合のヒト臍帯血（cord blood; CB）由来CD34⁺細胞増殖能

StemSpan 増殖用サプリメント

ヒトCD34⁺細胞の増殖向け

製品名	成分	特長	性能(7日培養後)
StemSpan™ CC100	・rh Flt3L ・rh SCF ・rh IL-3 ・rh IL-6	・早期および後期作用型の両方のサイトカインを含有・造血細胞の収量が多い	・有核細胞数：20-60倍・CD34⁺細胞数：最大10倍
StemSpan™ CC110	・rh Flt3L ・rh SCF ・rh TPO	・早期作用型のサイトカインを含有・CD34⁺の純度が高い	・有核細胞数：20-60倍・CD34⁺細胞数：最大10倍
StemSpan™ CD34+ Expansion Supplement	・rh SCF ・rh IL-3 ・rh IL-6 ・rh TPO ・other additives	・ヒトCD34⁺ HSPCの増殖を選択的に刺激・CD34⁺細胞の収量が多く、純度も高い	・有核細胞数：20-60倍・CD34⁺細胞数：10-40倍（図1）

*rh = recombinant human

各製品の特長と使い分けについて、詳しくはこちら＞＞

ヒト骨髄系細胞、巨核球、赤血球への分化向け

製品名	成分	推奨用途	性能（7日培養後）
StemSpan™ Myeloid Expansion Supplement II (100X)	・rh Flt3L ・rh SCF ・rh TPO ・rh M-CSF ・rh GM-CSF ・Supplements	ヒト臍帯血（cord blood; CB）由来CD34⁺細胞の増殖と単球分化を選択的に促進	ヒトCB由来CD34⁺細胞1個あたり、数百のCD14⁺単球を産生（表1）
StemSpan™ Myeloid Expansion Supplement (100X)	・rh SCF ・rh TPO ・rh G-CSF ・rh GM-CSF	ヒトCBまたは骨髄（bone marrow; BM）由来CD34⁺細胞の増殖と顆粒球分化を選択的に促進	ヒトCB由来CD34⁺細胞1個あたり、数千のCD15⁺顆粒球を産生（表1）
StemSpan™ Megakaryocyte Expansion Supplement (100X) （旧称　StemSpan CC220）	・rh SCF ・rh IL-6 ・rh IL-9 ・rh TPO	ヒトCBまたはBM由来CD34⁺細胞からの、巨核球前駆細胞の増殖と分化を選択的に促進	ヒトCB由来CD34⁺細胞1個あたり、数百の巨核球を産生
StemSpan™ Erythroid Expansion Supplement (100X)	・rh SCF ・rh IL-3 ・rh EPO	ヒトCBまたはBM由来CD34⁺細胞から、赤血球前駆細胞を選択的に増殖、分化	ヒトCB由来CD34⁺細胞1個あたり、数千の赤血球細胞を産生（図2）

*rh = recombinant human

表1. ヒトCB由来CD34⁺細胞からの骨髄系細胞産生能（基礎培地にStemSpan SFEM II使用）

製品名	総有核細胞数 / Input CD34+ Cell	MYELOID CELL % CD13+	MYELOID CELL % CD14+	MYELOID CELL % CD15+
StemSpan Myeloid Expansion Supplement (100x) (ST-02693)	5847 (2691-9003)	92 (89-95)	5 (3-8)	47 (39-55)
StemSpan Myeloid Expansion Supplement II (100x) (ST-02694)	2099 (933-3264)	94 (90-97)	74 (68-80)	11 (7-15)

図2. StemSpan基礎培地にStemSpan™ Erythroid Expansion Supplementを添加した場合の、ヒトCB由来CD34⁺細胞からの赤血球産生能

StemSpan ヒト用キット

NK、T、B細胞への分化向け

製品名	組成	キット構成品	特長	性能
StemSpan™ NK Cell Generation Kit	無血清	・StemSpan™ SFEM II ・StemSpan™ Lymphoid Progenitor Expansion Supplement (10X) ・StemSpan™ Lymphoid Differentiation Coating Material (100X) ・StemSpan™ NK Cell Differentiation Supplement (100X)	ヒト臍帯血（cord blood; CB）または骨髄（bone marrow; BM）由来CD34⁺細胞を、血清・間質細胞フリー条件下でNK細胞に分化	ヒトCB由来CD34⁺細胞1個あたり数千のCD56⁺ NK細胞を増殖（28日培養後、図3）
StemSpan™ T Cell Generation Kit	無血清	・StemSpan™ SFEM II ・StemSpan™ Lymphoid Progenitor Expansion Supplement (10X) ・StemSpan™ Lymphoid Differentiation Coating Material (100X) ・StemSpan™ T Cell Progenitor Maturation Supplement (10X)	ヒトCB由来CD34⁺細胞を、血清・間質細胞フリー条件下でT細胞に分化	・ヒトCB由来CD34⁺細胞1個あたり数千のCD3⁺TCRαβ⁺ T細胞を増殖・6週で大部分がCD4^＋CD8^＋ダブルポジティブ（DP）、1週の追加刺激でCD8^＋シングルポジティブ（SP）T細胞に成熟
StemSpan™ B Cell Generation Kit	無血清	・StemSpan™ SFEM II ・StemSpan™ B Cell Differentiation Supplement 1～4 (20X)	ヒトCB由来CD34⁺細胞を、血清・フィーダー細胞・コーティング材フリー条件下で、B細胞および抗体分泌細胞に分化	ヒトCB由来CD34⁺細胞1個あたり100個以上のCD19⁺ B細胞を増殖（35日培養後）

図3. StemSpan NK Cell Generation Kitによる、ヒトCB由来CD34⁺細胞からのCD56⁺ NK細胞の産生能

白血病細胞の培養向け

製品名	組成	キット構成品	特長	性能(7日培養後)
StemSpan™ Leukemic Cell Culture Kit	無血清	・StemSpan™ SFEM II ・StemSpan™ CD34+ Expansion Supplement (10X) ・UM729	ヒト骨髄性白血病細胞の培養、増殖、薬剤スクリーニングに最適化	・CD34⁺ CML細胞を約65倍に増殖・CD34⁺ AML細胞を約30倍に増殖

StemSpan主要文献　アプリケーション別

ウェビナー紹介

CD34+細胞のゲノム編集効率と培養条件の最適化

Optimizing CD34+ Cell Genome Editing for Efficiency and HSPC Maintenance

演者
Dr. Marta Walasek、Ms. Danielle Nguyen Truong

内容
CD34+細胞のゲノム編集を効率的に行うコツ、ゲノム編集効率の評価方法、HSPCの機能と編集効果を長期に維持するためのゲノム編集前後の最適な培養条件について説明します。（収録時間63分、2022年5月公開）

（ウェビナーの視聴には、STEMCELL Technologies社ホームページへのログインが必要です。）