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STEMCELL Technologies CloneR CloneR

  • 研究用

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CloneR™は、ヒトES/iPS細胞(hPSC)のクローニング効率とシングルセルとしての生存率を高める、組成が明確な無血清サプリメントです。シングルセルへの馴化なしにクローン細胞株を安定して作製できるため、遺伝的異常を獲得するリスクも最小限に抑えます。
CloneR™は、hPSC維持培養用の各種TeSR™培地、および任意の細胞培養マトリックスと併用できます。

さまざまなアプリケーションでのシングルセル生存率の改善や、より高いクローニング効率を達成するには、後継品の CloneR™2(ST-100-0691)をお試しください。

2018/05/14 12:00の製品情報

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本製品は研究目的にのみ使用し、人や動物の医療用・臨床診断用・食品用としては使用しないようにご注意ください。

製品の特長

CloneRは、ヒトES/iPS細胞をシングルセルでクローニングするサプリメントです

  • hPSCのゲノム編集を大きく促進
  • TeSR™シリーズの維持培地や、任意の培養基質と併用可能
  • シングルセル継代への馴化が不要
  • クローニング密度におけるシングルセルの生存を、さまざまなhPSC株で改善

クローニングのワークフロー

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培地はmTeSR1, mTeSR Plus, TeSR-E8、マトリックスはVitronectin-XF, Laminin-521, Corning Matrigelとの使用を評価済みです。

データ紹介

細胞株や播種方法によらず安定的にクローニング効率が向上

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mTeSR1およびTeSR-E8にCloneRを加えた場合、ROCK inhibitorを加えた場合に比べて複数の細胞株でクローニング効率が大幅に向上した。細胞株はヒトES細胞(H1, H7)およびiPS細胞(WLS-1C, STiPS-M001)を使用し、(A)クローン化密度 25 cells/cm2、または(B)FACSのシングルセルソーティング(1 cell/well)によって播種した。

コロニーのサイズ比較とクローン株の形態

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上段: CloneRを添加したmTeSR1で培養した細胞 (B) は、ROCK inhibitor (10 μM Y-27632) を加えたmTeSR1で培養した細胞 (A) に比べて大きなhPSCのシングルコロニーを形成。いずれも播種後7日目の画像。

下段: CloneRを加えたmTeSR1あるいはTeSR-E8培地で作製したクローン株は、hPSCの特徴の顕著な核小体および高い核-細胞質比を維持。(A) H1 hES cell line、 (B)WLS-1C iPS cell line。いずれもクローニング後、7回目の継代における代表的なコロニー像。

mTeSR Plus培地では、さらに高いクローニング効率を実現

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CloneRを添加したmTeSR Plusに播種したhPSCH1H9WLS-1CSTiPS-M001)は、CloneRを添加したmTeSR1以上のクローニング効率を示す。Vitronectin XFコーティングプレート上にhPSC25 cells/cm²で播種した。(n≧3

CloneR ユーザー様の声

疾患iPS細胞株の維持にmTeSR1を、クローニングにmTeSR1 + CloneRを使用しています。mTeSR1は播種密度が低くても安定した培養ができ、非常に使い勝手が良いです。またCloneRを添加すると、ROCK inhibitorよりもシングルセルでの生存率が高くなり重宝しています。
(F大学医学部・Y様)

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